薄層液基細(xì)胞學(xué)檢查技術(shù)(TCT,Thinprep cytologic test)由美國(guó)Hologic公司研發(fā),制片設(shè)備于1996年獲得FDA認(rèn)證,1999年進(jìn)入中國(guó),是細(xì)胞病理學(xué)檢查技術(shù)領(lǐng)域的重大突破。
TCT是目前國(guó)際應(yīng)用最廣泛的婦科宮頸病變篩查技術(shù)設(shè)備,可以100%發(fā)現(xiàn)宮頸癌,對(duì)宮頸癌前病變的檢出率比傳統(tǒng)涂片法提高23.3%,是最敏感、高效的細(xì)胞病理學(xué)檢查方法。除婦科樣本外,TCT制片設(shè)備在腦脊液、泌尿系統(tǒng)、甲狀腺腫物細(xì)針穿刺等多種非婦科樣本的細(xì)胞病理學(xué)檢查中,特別是腫瘤疾病的細(xì)胞病理診斷方面,均顯示出巨大的優(yōu)勢(shì)。
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TCT制片過(guò)程為全自動(dòng)化。其采用流體力學(xué)技術(shù),應(yīng)用專(zhuān)用高精密(微米級(jí))過(guò)濾膜對(duì)樣本中細(xì)胞進(jìn)行充分富集;隨后,利用電化學(xué)技術(shù),使細(xì)胞向玻片上自然吸附,制成單層細(xì)胞玻片。檢查樣本中的細(xì)胞成份得到充分富集,且細(xì)胞沒(méi)有受到擠壓等直接外力作用,細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)得到最佳的保護(hù)。相比離心法、沉降法等其他細(xì)胞制片方法,整個(gè)制片及固定過(guò)程均保持了細(xì)胞原有液態(tài)環(huán)境,降低細(xì)胞曝露于空氣發(fā)生蛻變、損傷的幾率,有利于細(xì)胞的鑒別與定性。
該技術(shù)方法極大提高了細(xì)胞病理學(xué)檢查的敏感性及準(zhǔn)確性。對(duì)于婦科疾病、甲狀腺腫物診斷、膀胱和尿道等泌尿系統(tǒng)腫瘤、腫瘤腦膜轉(zhuǎn)移等疾病的早期準(zhǔn)確診斷,具有巨大幫助。
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TCT制片設(shè)備采用全套進(jìn)口專(zhuān)用檢查材料,包括專(zhuān)用采樣刷、細(xì)胞保存液(唯一經(jīng)過(guò)美國(guó)FDA認(rèn)證可以進(jìn)行HPV檢測(cè)的液基細(xì)胞保存液)、高精可控過(guò)濾膜、電化學(xué)玻片等。其中,細(xì)胞保存液為甲醇基質(zhì),可快速凝固細(xì)胞骨架蛋白,充分保留DNA和RNA,100%保存細(xì)胞完整形態(tài)結(jié)構(gòu),極大提升細(xì)胞保存時(shí)間。該保存液為專(zhuān)機(jī)專(zhuān)用的專(zhuān)利產(chǎn)品,是唯一得到美國(guó)FDA認(rèn)證,一次取樣同時(shí)完成液基細(xì)胞學(xué)和HPV DNA或HPV mRNA檢測(cè)的細(xì)胞保存液???/span>明顯提高標(biāo)本滿(mǎn)意率,減少病人重復(fù)多次取樣,減少臨床醫(yī)生工作量;可以同時(shí)進(jìn)行衣原體、淋球菌等病原學(xué)測(cè)試以及免疫組化測(cè)試,還可用于各式分子生物學(xué)檢測(cè)。
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腦脊液細(xì)胞病理學(xué)檢查是腫瘤腦膜轉(zhuǎn)移診斷必須進(jìn)行的檢查方法。腦脊液中發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞是腦膜轉(zhuǎn)移確切診斷的唯一標(biāo)準(zhǔn)。傳統(tǒng)的腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查方法為細(xì)胞玻片離心法聯(lián)合瑞氏吉姆薩染色。傳統(tǒng)的制片方法,細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間曝露于空氣中,易造成細(xì)胞發(fā)生蛻變裂解而難以觀(guān)察及定性,大大降低檢查的敏感性,導(dǎo)致假陰性漏診。傳統(tǒng)細(xì)胞學(xué)檢查技術(shù)的診斷陽(yáng)性率僅約50%左右,假陰性率高達(dá)30-60%。
自2009年開(kāi)始,我院放療科潘振宇教授團(tuán)隊(duì)在國(guó)際上最早開(kāi)展TCT制片聯(lián)合巴氏染色進(jìn)行腦脊液細(xì)胞病理學(xué)檢查的新方法。對(duì)不同病理類(lèi)型腦膜轉(zhuǎn)移患者腦脊液細(xì)胞學(xué)進(jìn)行分析研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn),TCT檢測(cè)非常適用于腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查,顯著提升檢出陽(yáng)性率。對(duì)于細(xì)胞數(shù)量極低的腦脊液樣本,該技術(shù)設(shè)備可以對(duì)樣本中細(xì)胞充分富集,保持細(xì)胞全程液體環(huán)境制片,充分保護(hù)細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)完整性。TCT單次檢測(cè)陽(yáng)性率為79.5% (70/88) ,2次或以上檢測(cè)陽(yáng)性率為90.9% (80/88)。腦脊液中的肺腺癌、小細(xì)胞癌、大細(xì)胞癌、乳腺癌、鱗癌、惡性黑色素瘤、肝細(xì)胞癌等十余類(lèi)腫瘤細(xì)胞具有不同的細(xì)胞形態(tài)學(xué)特點(diǎn)。
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圖注:腦脊液中的腺癌細(xì)胞、乳腺癌細(xì)胞、鱗癌細(xì)胞、小細(xì)胞癌細(xì)胞、肺大細(xì)胞癌細(xì)胞、肝細(xì)胞癌細(xì)胞、惡性黑色素瘤細(xì)胞(TCT制片,巴氏染色)
潘振宇教授還在國(guó)際上首次開(kāi)展TCT制片聯(lián)合巴氏染色與傳統(tǒng)細(xì)胞玻片離心法聯(lián)合瑞氏吉姆薩染色的對(duì)照研究。研究發(fā)現(xiàn),TCT方法單次檢測(cè)陽(yáng)性率為73.3% (33/45) ,顯著高于細(xì)胞玻片離心法的檢測(cè)陽(yáng)性率(57.8%, 26/45)。應(yīng)用TCT制片的腫瘤細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)得到良好保護(hù),顯微鏡下可見(jiàn)細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)清晰,便于觀(guān)察定性。巴氏染色下,細(xì)胞核、胞漿及細(xì)胞核仁為灰藍(lán)色及紅色,對(duì)比性強(qiáng),便于觀(guān)察。而傳統(tǒng)瑞氏染色的實(shí)體腫瘤細(xì)胞整體成粉紅色,難以清楚分辨細(xì)胞結(jié)構(gòu)。
研究證實(shí),TCT技術(shù)較傳統(tǒng)細(xì)胞玻片離心法用于腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查具有顯著優(yōu)勢(shì),從方法學(xué)上提高了腦脊液細(xì)胞病理學(xué)檢查的陽(yáng)性率。該研究成果于2014年廈門(mén)召開(kāi)的第17屆中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)科年會(huì),及在揚(yáng)州召開(kāi)的第12屆中華醫(yī)學(xué)會(huì)細(xì)胞病理學(xué)年會(huì)進(jìn)行發(fā)言報(bào)告。代表性論文于2015年發(fā)表于PLoS One(IF: 3.24),并被歐洲腫瘤腦膜轉(zhuǎn)移診療指南采納。
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圖注:腫瘤細(xì)胞分別采用TCT技術(shù)聯(lián)合巴氏染色及傳統(tǒng)的細(xì)胞離心玻片法聯(lián)合瑞氏吉姆薩染色。對(duì)比可見(jiàn),TCT聯(lián)合巴氏染色細(xì)胞結(jié)構(gòu)保存良好,顯示清晰、立體,細(xì)胞數(shù)量較多,更易于良惡性細(xì)胞的定性。而傳統(tǒng)方法細(xì)胞腫脹、破裂,細(xì)胞器結(jié)構(gòu)顯示不清,顏色對(duì)比性不強(qiáng),難以定性。
我院為惠州市及整個(gè)粵東地區(qū)唯一引進(jìn)Thinprep TCT薄層液基細(xì)胞制片設(shè)備的單位。該設(shè)備的應(yīng)用,將極大提高我院及本地區(qū)細(xì)胞病理學(xué)檢查技術(shù)水平,提升多種腫瘤疾病的早期精確細(xì)胞病理診斷能力,為廣大患者提供高質(zhì)量的醫(yī)療技術(shù)服務(wù)。
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